Метод ПЦР скрытых инфекций

ПЦР: какие болезни помогает выявить и на чем основывается

› ЗППП

18.02.2020

Зачастую пациенты при обследовании у уролога, гинеколога, венеролога и врачей других специальностей получают направление на ПЦР. Что это такое, знают немногие. Разберемся, на чем основывается этот анализ, при каких заболеваниях назначается и как его сдать правильно, чтобы получить достоверный результат.

Что такое ПЦР метод

ПЦР (полимеразная цепная реакция) — диагностический метод, который позволяет обнаружить в человеческом организме ДНК возбудителей заболеваний, передающихся половым путем (ЗППП). Эта методика также применяется для установления отцовства, выявления наследственных патологий. Ее используют для экспериментов при клонировании и для определения новых генов.

Анализ ПЦР основывается на взятие различных жидкостей из организма в качестве биологического материала. Он позволяет увеличить количество ДНК на одном участке в 2 раза при помощи специальных ферментов. Благодаря этому удается получить больше информации для подтверждения присутствия патогенного микроорганизма в биоматериале. Это позволяет обнаружить даже скрытое заболевание.

У пациентов часто диагностируют ИППП методом ПЦР. Зачастую инфекции, передаваемые половым путем, протекают без выраженной симптоматики.

Их возбудителей сложно выявить при помощи других исследований, т.к. они обладают низкой чувствительностью к патогенам. А ПЦР способна определить ДНК микробов в единичном количестве.

Это невозможно сделать, например, при микроскопии и бактериологическом посеве.

Показания к назначению ПЦР на ЗППП

ПЦР на ИППП назначается при возникновении симптоматики венерических заболеваний:

• зуд и жжение в гениталиях;
• проблемы с мочевыведением;
• подозрительные выделения;
• покраснение влагалища у женщин или полового члена у мужчин;
• сыпь на гениталиях;
• разрастание эпителия в шейке матки;
• эрозии на половых слизистых;
• воспаления в мочеполовой системе;
• изменение цвета спермы при подозрении на ИППП у мужчин;
• увеличение лимфоузлов в паху;
• сбои в менструальном цикле;
• выкидыши, патологии беременности, проблемы с зачатием;
• киста яичников;
• спайки в органах малого таза;
• боли внизу живота;
• простатит у представителей мужского пола.

Вне зависимости от того проявлялись ли перечисленные симптомы, обследование методом ПЦР на ИППП (инфекция, передающаяся половым путем) должны периодически проходить люди, которые ведут беспорядочную половую жизнь, а также женщины при планировании беременности и во время вынашивания плода. Как правило, врач выдает направление на ПЦР, когда уже сданы анализы ОАК и ОАМ, соскоб из уретры и цервикального канала для ИФА, микроскопии или бактериологии., но возбудителей определить не удалось.

Какие инфекции диагностируют методом ПЦР

Диагностика ИППП ПЦР позволяет обнаружить:

• Хламидиоз и уреаплазмы. Первое заболевание провоцируют хламидии. Они ведут жизнедеятельность в уретре, кишечнике, шейке матки. Без должного лечения приводят к бесплодию. Второй возбудитель вызывает уреаплазмоз. Чаще всего эта болезнь протекает бессимптомно и становится причиной выкидышей.
• ВИЧ, сифилис и нейросифилис. Последнее заболевание по симптоматике схоже с менингитом.
• Герпес (простой ВПГ 1 и 2 тип).
• Токсоплазмоз и краснуху.
• Инфекционный мононуклеоз (ДНК вируса Эпштейн-Барр-ВЭБ).
• Микоплазмоз. Мужчины чаще всего являются только носителями инфекции.
• Трихомониаз. У представителей мужского пола чаще всего протекает бессимптомно или проявляется только жжение при походах в туалет «по-маленькому». У женщин зачастую бывает обнаружено сопутствующее заболевание — трихомонадный кольпит.
• Кандидоз (молочница).
• ВПЧ штаммы 16 и 18 (вирус папилломы человека). Есть в организме практически у каждого человека. Большинство штаммов не представляют угрозы, но есть и такие, которые могут привести к онкологии.
• Цитомегаловирус. Обычно не провоцирует выраженную клиническую картину. Протекает в форме обычного ОРВИ.
• Гонорея. Провоцирует желтовато-белые выделения с неприятным запахом.
• Гарднереллез (бактериальный вагиноз). Клиническая картина схожа с молочницей.
• Туберкулез, листериоз, хеликобактерную инфекцию.
• Боррелиоз, клещевой энцефалит.

Как стало понятно, ПЦР анализ способен обнаружить возбудителей не только венерических заболеваний. Поэтому для постановки точного диагноза эту методику используют специалисты разных областей: урологи, гематологи, фтизиатры, гинекологи, гастроэнтерологи, онкологи, инфекционисты, венерологи.

Преимущества и недостатки ПЦР диагностики

ПЦР анализ на ИППП обладает такими преимуществами:

Высокая чувствительность и точность показаний. Если в биоматериале присутствует ДНК возбудителя даже в единичном количестве, диагностика его обнаружит.Быстрое получение результатов.На ПЦР можно производить любой забор биологического материала.Специфичность 100%.

Во время исследования обнаруживают специфичный фрагмент ДНК, принадлежащий определенному патогену.Доступность метода. Для проведения диагностики не нужно специального дорогостоящего оборудования, поэтому ее делают во многих клиниках.Достаточно взять биоматериал один раз, чтобы обнаружить инфекцию.

вероятность ложного результата (хотя такое бывает крайне редко, но все-таки риск есть)если микроорганизмы мутируют, то обследование не выявит их ДНК (такое бывает крайне редко);чтобы обнаружить скрытые инфекции (например, трихомониаз или хламидиоз), бывает необходима стимуляция;процедура достаточно дорогостоящая (500-2000 руб.).

Достоинств у ПЦР диагностики ИППП значительно больше, поэтому ее очень часто используют в медицинской практике.

Как подготовиться к ПЦР исследованию на ЗППП

Перед диагностикой ИППП к ПЦР нужно подготовиться:

• Обследование крови должно совершаться натощак. Запрещены и напитки, кроме небольшого количества питьевой воды.
• За сутки нельзя пить алкоголь, курить, нужно снизить физические нагрузки и избегать стрессовых ситуаций.
• За 2-3 дня до диагностики ИППП методом ПЦР отказаться от жареных и жирных блюд.
• За 1-2 суток при сдаче мочи отказаться от интимной близости. Биологический материал собирать сразу после пробуждения.
• При сдаче семенной жидкости за 4 дня не переохлаждать и не перегревать организм. За 2 суток не заниматься сексом.
• Женщинам рекомендуется сдавать мазок ПЦР в последний день менструального цикла, когда еще есть незначительные выделения. Не вступать в половой контакт за 2 суток, не проводить гигиену гениталий за 3 часа.
• При диагностировании сыпи берется соскоб. Перед ним за несколько дней нельзя использовать препараты местного назначения.
• Не принимать антибиотики за 2-4 недели до сдачи мочи и другого биологического материала. Если отменить лекарства невозможно, сообщить об этом медицинскому работнику.
• Накануне вечером перед сдачей анализа на ЗППП ПЦР гигиену половых органов осуществлять только водой, без использования гигиенических средств.

Выполнение этих правил необходимо для достоверного диагноза. Если точного результата нет, через сколько сдавать анализ повторно, решает врач.

Расшифровка результатов обследования

Такой анализ как ПЦР мочи и другого биологического материала бывает двух типов:

• Качественным. Результаты в листке с анализом могут иметь отрицательное и положительное значение. В первом случае возбудитель не найден, а во втором обнаружен.
• Количественным. Определяет число определенных патогенов. Значение 8х105МЕ/мл указывает на острую форму болезни, а 4х105МЕ/мл на процесс выздоровления.

Более точную расшифровку может дать только специалист.

Сдача ПЦР анализов после окончания антибиотикотерапии

После того, как пациент пролечился от заболевания, ему необходимо сдать контрольный анализ. Однако антибиотикотерапия может негативно отразиться на ПЦР.

Дело в том, что частицы уже погибших патогенов еще некоторое время находятся в организме. ПЦР не сможет определить их жизнеспособность и даст ложный результат.

Поэтому перед тем, как сдавать анализы, после прохождения курса лечения должно пройти минимум 4 недели.

Как часто сдавать ПЦР анализ на ЗППП, если ничего не беспокоит

При возникновении симптоматики заболеваний, которые диагностирует ПЦР, нужно сразу же сдать данный анализ. Также диагностика показана женщинам во время беременности, людям, которые имели за последние полгода двух и более половых партнеров. Анализ назначается и через месяц после окончания лечения ИППП, чтобы убедиться, что все патогены погибли.

Заключение

ПЦР диагностика является предпочтительной при подозрении на ЗППП. Она позволяет не только выявить ДНК возбудителя, но и определить его количество. Благодаря этому врач сможет подобрать наиболее эффективную методику терапии, а значит, удастся избежать опасных осложнений.

ПЦР: какие болезни помогает выявить и на чем основывается Ссылка на основную публикацию

Пцр на половые инфекции: что сдавать и как не переплатить?

Наталья Долгополова

Врач-терапевт, медицинский редактор

Диагностика методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) показывает наличие половых инфекций с очень большой точностью. С помощью ПЦР анализа можно найти все, что угодно. Главное, знать, что искать.

Совсем недавно ПЦР использовали как последнюю надежду, когда с помощью других диагностических процедур подтвердить или исключить диагноз не получалось — методам не хватало чувствительности.

Сейчас ПЦР-диагностику освоили во многих крупных лабораториях и продвигают её в качестве коммерческого метода, доступного каждому, кто хочет обследоваться.

Обычно предлагают готовые наборы анализов: ПЦР на 3-5-7-14-16 и другое количество инфекций, передающихся половым путем.

Нередко анализ навязывают тогда, когда обследоваться совсем не обязательно или можно обойтись более дешевой диагностикой без потери качества. Давайте разберемся, когда нужно искать половые инфекции (ЗППП), и когда это необходимо делать именно методом ПЦР.

Инструменты для забора материала на ПЦР
Для ПЦР диагностики ЗППП используют обычно мазки и соскобы из мочеиспускательного канала, влагалища, шейки матки, прямой кишки. Забор материала — дело нескольких минут.Врач делает это с помощью стерильного зонда в виде ватной палочки, щетки, «ершика» или специальной ложки.

Как часто сдавать ПЦР анализ на ЗППП если ничего не беспокоит?

Обследоваться на ЗППП можно хоть каждый день — по желанию. Все зависит от наличия свободного времени, денег и уровня вашей тревожности. Есть только один нюанс. Метод ПЦР — очень точный анализ. С его помощью можно обнаружить в недрах организма считанные копии вируса или бактерии.

И ни один честный врач не скажет вам наверняка, насколько эта находка опасна для здоровья, и каков достоверный риск осложнений.

Поэтому решите для себя заранее, сможете ли вы спокойно жить дальше или будете лечить результаты анализа даже в тех случаях, когда до похода в клинику у вас не было никаких проблем с интимным здоровьем.

Иначе обстоят дела с обследованием на ЗППП в группе риска — у людей с рискованным сексуальным поведением и беременных женщин. Им необходимо периодически сдавать анализы на половые инфекции, даже если нет никаких жалоб на здоровье.

Сексуальным экстремалам профилактическое обследование нужно, чтобы выявить факт инфицирования еще до появления симптомов и как можно раньше принять меры для защиты своих половых партнеров от заражения. Беременным женщинам диагностика ЗППП необходима, потому что многие мамины инфекции передаются будущему малышу.

Даже если нет симптомов у женщины, последствия для ребенка могут быть тяжелыми.

Согласно принятым государственным программам как в нашей стране, так и в США, профилактическая диагностика (скрининг) на ЗППП проводится только среди людей с рискованным сексуальным поведением и у беременных женщин.

У них делают анализ на сифилис, гонорею, трихомониаз, хламидиоз, ВИЧ, гепатит В и С. Скрининг на герпес и ВПЧ не проводят даже в группе риска.

Для остальных людей в отсутствии жалоб и клинических проявлений обследование на ЗППП вообще не рекомендуется.

А как обнаружить скрытые инфекции у мужчин и женщин?

По настоящему скрытые инфекции — это редкость. Гораздо чаще встречаются не скрытые, а забытые инфекции: когда вроде что-то было, но само прошло, хотя инфекция никуда не делась, а только перешла в вялотекущую форму.

Дело в том, что многие половые инфекции имеют волнообразное течение. Первые симптомы быстро пропадают без лечения.

Затем наступает так называемая «скрытая» стадия: субъективные жалобы отсутствуют, человек считает, что выздоровел, но инфекция медленно развивается, вызывая хроническое воспаление.

Спустя какое-то время симптомы болезни обычно возвращаются, только уже вместе с осложнениями. Поэтому любые проблемы в интимной сфере решайте безотлагательно.

И еще! Если вы 1-2 раза в год профилактически посещаете профильного врача (гинеколога — для женщин, уролога — для мужчин), то вероятность пропустить «скрытую» ЗППП снижается многократно.

Врач во время осмотра видит признаки воспаления, может заподозрить инфекцию и назначить анализы, даже если вы не предъявляете никаких жалоб. Вот здесь очень важно найти врача, который не заинтересован в коммерческой составляющей диагностики и лечения.

Читайте отзывы, а если сомневаетесь — ищите второе мнение.

Когда анализ на ЗППП действительно необходим?

Если есть жалобы со стороны мочеполовых органов:

• появились или изменились выделения,
• есть боль или дискомфорт в нижней части живота,
• проблемы с мочеиспусканием, эрекцией (у мужчин) и менструациями (у женщин),
• не получается забеременеть.

Если есть эти и другие симптомы половых инфекций, тогда однозначно нужно обследоваться. Чем быстрее, тем лучше! Даже если вы уверены в себе и своем половом партнере или всегда пользуетесь барьерными методами контрацепции.

Это как раз тот случай, когда работает правило — выявить на ранней стадии. Кстати, обнаружение какого-либо возбудителя ЗППП в крепких парах далеко не всегда является доказательством измены.

Поэтому положительный ПЦР анализ ни в коем случае не должен быть причиной для скандала или разрыва отношений.

И еще целесообразно провериться на инфекции тем парам, которые планируют беременность. Что искать?

• Нужно удостовериться в отсутствии сифилиса и гонореи. Эти заболевания однозначно потребуют лечения, будучи обнаруженными во время беременности. Кроме того, высок риск прерывания беременности, врожденных уродств у ребенка, а также его инфицирования и болезней.
• Имеет смысл сдать анализ на хламидиоз — выявление этой инфекции во время беременности (даже если нет никаких симптомов) по существующим стандартам будет поводом к назначению антибиотиков. Поэтому лучше сдать анализы и, при необходимости, пролечиться заранее, чем во время беременности взвешивать гипотетические риски, оказавшись перед выбором: пить или не пить антибиотики.

А вот обследоваться просто так, без симптомов, на ВПЧ, герпес, цитомегаловирус, а также условные патогены (уреаплазму, кандиду) на этапе планирования беременности нет необходимости, так как результаты диагностики, какими бы они не оказались, ни на что не повлияют. Их не лечат, если нет признаков болезни.

Какой метод диагностики выбрать?

Клиники предлагают готовые пакеты услуг: ПЦР на разное количество инфекций — от 3 до 16. На самом деле метод полимеразной цепной реакции действительно незаменим только при определении четырех возбудителей половых инфекций, это:

• ВПЧ (HPV16, 18, 31, 33, 35, 39, 45 и др.)— вирус папилломы человека;
• ВПГ (HSV 1, 2) — вирус простого герпеса;
• хламидия;
• микоплазма.

Из этого списка ПЦР на ВПЧ назначают только тогда, когда у женщины есть изменения на шейке матки. Просто так этот анализ не делают. ПЦР на герпес при отсутствии проявлений инфекции не имеет никакого смысла.

Остается анализ ПЦР на микоплазму и хламидию — это мелкие бактерии, выявить их другими методами можно, но гораздо сложнее. Хламидии вызывают всевозможные воспаления в мочеполовой системе.

Хроническая инфекция может осложняться образованием спаек в малом тазу, а значит болями и, возможно, бесплодием. Считается, что даже бессимптомный хламидиоз опасен, хотя достоверных данных и прогнозов на этот счет нет.

По существующим стандартам, если хламидию нашли, это нужно лечить. 

Чтобы выявить микоплазменную инфекцию, сдают количественный ПЦР, чтобы определить, сколько именно бактерий поселилось внутри. Большая часть микоплазм может существовать мирно, не причиняя вреда человеку, только если их больше 104 КОЕ/мл и есть признаки воспаления, назначают лечение.

Для других инфекций, передающихся половым путем, существуют не менее достоверные, но более дешевые и простые анализы:

• на сифилис — микроскопия мазка, иммуноферментный анализ (ИФА) крови;
• на гонорею, трихомониаз, кандидоз — микроскопия мазка, бактериологический анализ;
• на ВИЧ, гепатиты В, С — ИФА и ПИФ — иммунологические исследования крови.

Простой мазок и бактериологический анализ дают, порой, гораздо больше информации об интимном здоровье, чем ПЦР на 16 инфекций, так как показывают не только наличие и количество возбудителя, но и его чувствительность к различным антибиотикам, а также признаки воспаления.

Резюме

1. Найдите доверенного гинеколога или уролога (для мужчин) и посещайте его раз в полгода-год даже если ничего не беспокоит. Врач направит вас на обследование, если будет необходимость. Это дешевле и надежнее, чем сдавать ПЦР на ЗППП «на всякий случай». Кстати, по показаниям все анализы на ЗППП можно сдать бесплатно, по полису ОМС.

2. Появились жалобы со стороны мочеполовых органов, особенно если вы не исключаете инфекцию, постарайтесь посетить врача в течение нескольких дней.

3. Если ваша интимная жизнь подходит под определение «рискованной», сдавать анализы на ЗППП нужно после каждой смены полового партнера, но не реже, чем раз в полгода.

4. Анализ ПЦР оправдан для диагностики хламидиоза, микоплазмоза, уреаплазмоза. При этом ПЦР на микоплазму и уреаплазму имеет смысл только тогда, когда есть симптомы болезни или признаки воспаления, заметные врачу при осмотре.

5. Сифилис, гонорея, трихомониаз, кандидоз, ВИЧ-инфекция и гепатиты качественно определяются другими способами. Диагностика методом ПЦР этих инфекций — необоснованная трата денег, из разряда «любой каприз за ваши деньги».

6. На этапе планирования беременности целесообразно, хотя и не обязательно, сдать ПЦР анализ на хламидиоз, а также обычные тесты на сифилис и гонорею.

Наталья Долгополова

Врач-терапевт, медицинский редактор

Пцр диагностика на иппп

Лабораторная диагностика — это совокупность методов, которые помогают анализировать различные биологический материал при помощи специального оборудования. Для выявления инфекций, передающихся половым путем, существует несколько эффективных методов. Самым точным и быстрым является ПЦР.

В отличие от бак посева, который проводится в течение недели, ПЦР помогает выявить возбудителя в тот же день. Кроме того, при помощи такого исследования возможно обнаружить даже скрытые и вялотекущие процессы, когда количество возбудителя в организме минимально. Рассмотрим, что такое ПЦР диагностика и как она осуществляется.

Что такое ПЦР метод

Полимеразная цепная реакция или ПЦР — это метод исследования, который позволяет обнаружить нуклеиновые кислоты (ДНК) микроорганизмов, добиться повышения их концентрации в биологическом образце.

Метод используется в медицине не только в качестве анализа на ЗППП, но и для установления отцовства, для диагностики наследственных патологий.

Метод применяют и в экспериментальных целях для клонирования и выделения новых генов.

Метод ПЦР диагностики основан на возможности удвоения необходимого участка ДНК при помощи специальных ферментов.

Благодаря такому методу удается получить достаточный участок ДНК, чтобы подтвердить наличие того или иного микроорганизма. Таким образом, ПЦР помогает обнаружить даже скрытую инфекцию, если в образце присутствуют молекулы ее ДНК.

Особенно актуален метод полимеразной цепной реакции в венерологии, гинекологии и урологии для диагностики ИППП. Дело в том, что большинство инфекций развиваются медленно и никак себя не проявляют.

Кроме того, их сложно обнаружить при помощи других исследований из-за недостаточной чувствительности.

Особенно опасны вирусы, такие как ВПЧ (вирус папилломы человека), ВИЧ, гепатит, вирус герпеса которые могут приводить к инвалидности, смерти пациента, развитию онкологии.

Диагностика ИППП методом полимеразной цепной реакции помогает обнаружить единичные клетки микроорганизмов, что невозможно сделать при помощи микроскопического или бактериологического исследования. Также метод очень эффективен в диагностике внутриклеточных паразитов, например, хламидий.

Полимеразная цепная реакция показана пациентам, у которых можно заподозрить наличие инфекции, передающейся половым путем. Основные симптомы, которые могут выступать показанием к сдаче анализов:

Как правило, полимеразная цепная реакция показана, если пациент уже сдал ОАК и ОАМ, мазок из влагалища и уретры с микроскопическим и бактериологическим исследованием или ИФА (иммуноферментный анализ), а возбудителя выявить не удалось.

ПЦР используется не только для выявления ИППП, метод эффективен в отношении следующих инфекций:

• гарднереллез;
• сальмонеллез;
• цитомегаловирус;
• гепатиты;
• токсоплазмоз;
• краснуха;
• мононуклеоз и др.

Анализ на скрытые инфекции нужно сдать не только тем пациентам, которые уже испытали на себе симптомы заболевания, но и в качестве меры профилактики, если планируется беременность.

Полимеразная цепная реакция показан людям, которые ведут беспорядочную половую жизнь и могли заразиться ИППП.

Преимущества и недостатки ПЦР диагностики

Современные специалисты при выборе метода диагностики ИППП рекомендуют именно ПЦР. Преимущества метода:

1. Полимеразная цепная реакция очень чувствительна. Микроорганизм будет обнаружен, даже если он находится в организме в единичных количествах.
2. Метод позволяет точно определить микроорганизм по его ДНК.
3. Для диагностики подойдет любая биологическая жидкость — кровь, моча, слюна и тд. ПЦР проводят даже для оценки качества почвы и воды.
4. Диагностика выполняется очень быстро, результат можно получить через 3 часа после сдачи материала.

Существует у метода и одна особенность, которую можно причислить к недостаткам. Так, полимеразная цепная реакция является сверхчувствительным способом диагностики, который может давать ложно положительные результаты.

Например, если недостаточно обработали оборудование, пипетку или тару, в которую помещают биологический материал, и в ней остался минимальный след ДНК какого-либо микроорганизма, при анализе ДНК размножится и заключение будет неверным.

Поэтому специалисты рекомендуют обязательно пересдавать биологический материал, особенно при очень негативном результате, и желательно в другой клинике. Также не стоит приступать к лечению, имея лишь анализ из лаборатории на руках, нужно обязательно проконсультироваться с врачом.

Подготовка к исследованию на ИППП

Любое лабораторное исследование требует исключить факторы, которые могут негативным образом сказаться на результате. К таким факторам относят:

1. Прием лекарственных препаратов. Лекарства могут различным образом влиять на результаты исследования и вызывать непредсказуемые итоги. Нужно сообщить врачу по возможности прекратить принимать лекарства.
2. Употребление алкоголя накануне сдачи материала.
3. Физические и эмоциональные перегрузки.
4. Приемы пищи.

Таким образом, чтобы правильно сдать кровь или мазок, необходимо:

1. Отказаться от приема лекарств, не начинать заниматься самолечением.
2. Кровь сдавать натощак.
3. Собирать первую порцию мочи, доставить ее в течение 2 часов.
4. Перед сдачей мазка гигиенические процедуры запрещены, не надо делать спринцеваний, нельзя использовать крема и свечи.
5. Женщинам нельзя сдавать мазок сразу после ручного бимануального исследования.
6. Отказаться от курения и алкоголя.

Если врачу необходим в результате возбудитель урогенитального воспалительного процесса, то пациенту рекомендуется перед сдачей мазка не мочиться в течение 3 часов. А вечером перед сдачей анализа нельзя мыть половые органы.

Не проводят лабораторную диагностику мазков у женщин во время менструации. Если у пациентки начались месячные, то сдать анализ можно только на 2 сутки после окончания кровянистых выделений.

Забор материала для исследования

Забор материала осуществляет несколькими методами, все зависит от вида инфекции. Для выявления ЗППП берут мазок у женщин из влагалища, шейки матки и уретрального канала, у мужчин из уретры.

Для взятия мазка женщина размещается на гинекологическом кресле. Во влагалище вводят стерильное гинекологическое зеркало. Гинеколог при помощи ватного тампона осуществляет соскоб со стенки влагалища и с шейки матки, который хранят в физиологическом растворе в холодильнике.

У мужчин мазок берут из цервикального канала. Врач использует ватный тампон, которые вводят в уретру. Собранный биологический материал также размещают в физиологическом растворе и в холодильнике. Затем материалы отправляются в лабораторию для дальнейшего исследования.

Кроме мазка для диагностики ИППП может быть исследована моча пациента.

Но этот метод является нежелательным, так как трудно добиться от пациента сбора идеального материала. Не стоит забывать, что в воздухе находятся частички слюны, пыль, в том числе и частицы ДНК микроорганизмов. В лаборатории постоянно проводят кварцевание и обработку помещения антисептиками, поэтому вероятность заражения образца извне минимальна.

Для ПЦР анализа можно использовать и кровь пациента. Обычно таким способом диагностируют герпес и цитомегаловирус, гепатит, ВИЧ. Образцы крови берут из пальца или из вены.

Полимеразную цепную реакцию секрета простаты проводят мужчинам, если имеется простатит и есть подозрение на наличие специфической инфекции.

Для взятие сока простаты проводят массаж предстательной железы через прямую кишку, в процессы которого и происходит выделение нескольких капель биологической жидкости.

ПЦР спермы сдают при бесплодии и эректильной дисфункции, так как есть подозрение на наличии инфекции в яичках.

Как проходит диагностика

ПЦР анализ проводят в специальном приборе, которые нагревает и охлаждает образцы генетического материала, он называется амплификатор. Чтобы начать исследования, из полученного биоматериала выделяют молекулы дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК), они содержатся почти во всех клетках организма.

В процессе исследования необходимо амплифицировать (размножить) ДНК матрицу методом репликации (копирования участка), для этого используются праймеры ( короткие фрагменты ДНК, которые необходимы для соединение цепочек ДНК), ДНК-полимеразу (фермент) и другие необходимые компоненты, в частности буферный раствор, ионы магния и др.

В процессе подготовки материала к исследованию много раз двойную матрицу ДНК нагревают примерно до 95°C, чтобы разрушить водородные с вязи. Матрицы распадаются, затем температуру снижают до, чтобы праймер связался с каждой одноцепочной матрицей. Температурный режим зависит от используемых праймеров.

Если праймер прикрепился к цепочке ДНК и она размножилась, значит результат анализа положительный. Лаборант сделает вывод, что исследуемый возбудитель в организме обнаружен. Для каждого микроорганизма используют специальные праймеры.

Чтобы визуализировать изменения, при помощи фермента ДНК-полимеразы происходит копирование матрицы. Весь этот процесс повторяют от 20 до 35 раз. Когда появилось достаточное количество цепочек ДНК, производят их наращивание при необходимости, чтобы достроить одноцепочные фрагменты. В результате лаборант может визуально оценить результаты и составить заключение.

Какие инфекции выявляет комплекс ПЦР 12

В современных лабораториях пациенты могут пройти специальный комплексный анализ на ИППП, который называется ПЦР 12. Он позволяет обследоваться на 12 половых инфекций. Для исследования берут мазки из влагалища, шейки матки, уретры. Как правило, врач выбирает наиболее пораженную область.

Анализ ПЦР 12 поможет выявить следующие инфекции:

• ВПГ (герпес 1 и 2 типа);
• ВПЧ (штаммы нужно уточнить в лаборатории);
• Хламидии;
• Микоплазма;
• Уреаплазма;
• Гонококк;
• Гарднерелла;
• Трихомонада;
• Кандида (вызывает кандидоз или молочницу);
• Цитомегаловирус;
• Мононуклеоз;
• ВИЧ.

Результаты исследования можно получить на следующей день или через день после сдачи биологического материала. Как правило, длительность исследования зависит от загруженности лаборатории.

Расшифровка результатов анализа на ИППП

Результат анализа может быть положительным или отрицательным, поэтому каких-либо норм не существует.

Если в биологическом образце есть хотя бы минимальные следы патогенного микроорганизма, эта часть ДНК размножится и результат анализа будет положительным.

После получение результатов на руки пациенту настоятельно рекомендуется обратиться к врачу, а не пытаться самостоятельно диагностировать заболевание и лечить его. Дело в том, что даже если возбудитель обнаружен, это не значит, что обязательно нужно пить таблетки, особенно антибиотики.

Так, гарднереллу относят к условно-патогенным микробом. Ее нахождение во влагалище не значит, что нужно обязательно лечиться, тем более, если нет воспаления. Похожим образом дела обстоят и при обнаружении микоплазмы и уреаплазмы. Если никаких симптомов нет, достаточно укреплять иммунитет и регулярно обследоваться.

Герпес и ВПЧ — это вирусы, которыми заражены практически все люди на планете Земля. Таким образом, анализ на ПЦР может показать наличие вируса, но лечение пациенту не потребуется, если микроорганизм не вызывает появление высыпаний и других симптомов воспалительного процесса.

С другой стороны, если обнаружены трихомонады, гонококки, спирохеты, то нужно повторить анализ и быстрее приступать к лечению. Потому что терапию этих инфекций лучше начинать на ранней стадии, дабы избежать тяжелых осложнений — инфицирования внутренних органов, развития спаек и бесплодия, сепсиса и тд.

Инфекционный мононуклеоз — это очень заразное заболевание. Если его обнаружили, то пациента необходимо госпитализировать в инфекционный стационар. А при обнаружении ВИЧ пациенту требуется срочное обследование и специфическое лечение. Если не начать его вовремя, вероятно развитие осложнений и гибель больного.

Заключение

Полимеразная цепная реакция — это самый эффективный анализ на скрытые инфекции и ЗППП, который сейчас существует. Если есть подозрения, что пациент заразился ИППП, обследование нужно пройти в обязательном порядке. ПЦР диагностика являются доступным исследованием, стоимость которого варьируется от 500 до 2000 рублей, в зависимости от объема.

Положительный результата анализа — повод обследоваться у врача и начать лечение. Нужно помнить, чем раньше начинается терапия ИППП, тем больше шансов навсегда избавиться от патогенного микроба и забыть о неприятных симптомах заболевания.

Анализы ПЦР на 12 инфекций: сущность и правила сдачи

ПЦР диагностика — это методика, основанная на применении полимеразной цепной реакции, с помощью которой можно обследовать человека на инфекционные и наследственные заболевания.

Анализы ПЦР на 12 инфекций показывают результат, несмотря на то, остро протекает заболевание или хронически. Некоторые специалисты считают ПЦР 12 обязательным анализом и не ставят без него окончательный диагноз.

Результаты могут быть положительными даже задолго до появления симптоматики болезни.

В 20 веке Кэри Мюллис из США открыл явление полимеразной цепной реакции. В настоящее время метод ПЦР является золотым стандартом в некоторых сферах медицины. Метод является максимально эффективным для выявления болезни в активной стадии, поскольку бывают случаи, что в активной стадии обычные методы не дают такого точного результата.

Преимущества ПЦР диагностики

Диагностика инфекционных процессов при помощи ПЦР достаточно актуальна в современном мире. Преимуществами данного вида обследований являются следующие моменты:

1. Обнаружение инфекционного возбудителя в анализах. Анализ предполагает выявление ДНК или РНК инфекционного агента.
2. Практически исключены ложные и ошибочные реакции.
3. Методика ПЦР 12 максимально чувствительная. Благодаря данному методу можно обнаружить даже единичные клетки инфекционных агентов.
4. Результат ПЦР на скрытые возбудители готов уже через 4 часа после проведения процедуры.
5. Способность обнаружения инфекционных агентов без отсутствия характерной симптоматики для заболевания. Метод достаточно эффективен и по происшествии конкретной болезни.

В современном мире ПЦР диагностика инфекций развивается ускоренными темпами. Методика активно совершенствуется. Появляются новые подвиды обследования ПЦР. Благодаря развитию данного метода обследования он становится максимально доступным широкому кругу людей, а стоимость при этом постепенно изменяется.

Основа полимеразной цепной реакции

Метод ПЦР проводится исключительно в лабораторных условиях. Для его осуществления используются специальные ферменты, которые увеличивают в несколько раз структуру ДНК и РНК больного.

Должно образоваться такое число ДНК и РНК, чтобы можно было провести визуальный анализ.

Во время обследования происходит копирование того участка РНК или ДНК, который идеально подходит под требуемые условия.

В лаборатории существует соответствующая база данных, в которой указано точное строение различных инфекционных агентов. Благодаря методу ПЦР можно не просто увидеть возбудителя, но и подсчитать его количественное соотношение.

ПЦР-диагностика предполагает и определенные новшества, среди которых можно выделить следующие:

• введение мутаций;
• соединение отдельных фрагментов ДНК;
• определение отцовства и др.

Инфекции, выявляемые ПЦР-анализом

ПЦР диагностика может выявить следующие инфекционные процессы:

• ВИЧ;
• гепатиты следующих разновидностей: А, В, С, G;
• вирус Эпштейн-Барра, возбудитель инфекционного мононуклеоза;
• цитомегаловирус;
• микобактерии туберкулеза;
• герпес 1 и 2 типа;
• многие инфекции, передающиеся половым путем: уреаплазмоз, гарднереллез, хламидиоз, микоплазмоз, трихомониаз.
• ВПЧ и его онкогенные подвиды;
• клещевой энцефалит и боррелиоз;
• кандидозная инфекция;
• листериоз;
• инфекция хеликобактер пилори.

И это лишь часть наиболее распространенных инфекций, которые можно выявить при помощи ПЦР. ПЦР анализ крови активно применяется в гинекологической сфере медицинской практики, а также в таких областях, как:

• пульмонологическая;
• фтизиатрическая;
• гастроэнтерологическая;
• онкологическая;
• многие другие разделы медицины.

Правила сбора материала на анализ

Чужеродные ДНК и РНК можно выявить, обследовав разнообразные биологические жидкости конкретного человека. Для того чтобы обследовать человека на присутствие определенных инфекций, передаваемых половым путем, необходимо взять на пробу выделения из половых органов (мазок или соскоб) больного и его мочу.

Если возникла необходимость обследовать человека на различного рода инфекции (ВИЧ, герпес, гепатит и другие), то берется ПЦР анализ, для чего используется кровь больного.

Чтобы диагностировать герпетическое поражение, мононуклеоз, нужно взять мазок из полости рта больного. Для подтверждения ЦМВИ для осуществления анализа берется моча больного. Возникают случаи, когда обследуют спинномозговую жидкость для выяснения причин возникших неврологических отклонений.

Врач-пульмонолог при этом обследует методом ПЦР мокроту и жидкость из плевры конкретного больного.

Если у новорожденного ребенка возникло подозрение на внутриутробное инфицирование, врачи берут анализ околоплодных вод у беременной женщины и кусочек тканей плаценты.

Сдача анализа: особенности процедуры и расшифровка результатов

Все пациенты, обследуемые по методу ПЦР, получают наиболее достоверный результат. В данном случае возникновение ошибок практически исключено. Результаты данного анализа готовятся достаточно быстро, что облегчает постановку диагноза и обеспечивает своевременное назначение лечебных мероприятий.

Достоверность результата ПЦР напрямую зависит от правильности сдачи материала на обследование. Материал не должен быть загрязнен, иначе результат исследования не будет объективен. К наиболее важным рекомендациям перед сдачей анализа ПЦР относятся следующие требования:

1. Запрещено проявлять половую активность за сутки до проведения анализа.
2. Анализ крови на инфекции необходимо сдавать на голодный желудок в утреннее время.
3. Моча сдается утром в стерильный контейнер.

Результат анализа будет готов через 1,5-2 суток после проведения рассматриваемой процедуры. Встречаются такие ситуации, когда результат может быть подготовлен в тот же день.

Расшифровка результатов

Результат данного вида обследования может быть положительным и отрицательным. Отрицательный результат анализа крови говорит о том, что инфекционных элементов в сданном материале нет. Большое количество проведенных анализов ПЦР показывает отрицательный анализ.

Положительный анализ ПЦР подтверждает тот факт, что в сданном материале обнаружены инфекционные агенты и необходимо качественное, максимально эффективное лечение больного.

Результат может быть положительным, но какие-либо проявления заболевания отсутствуют. Это говорит или о начале заболевания, или о его носительстве. Если выявлено носительство болезни, то никакие лечебные мероприятия не требуются. Просто необходимо наблюдаться у специалиста. Примерами таких заболеваний являются:

• папилломавирусная инфекция;
• герпес и др.

Обычно их обнаруживают в слюне, соскобе из цервикального канала, уретре.

Однако необходимо помнить, что больной человек может заразить абсолютно здоровых, несмотря на то, что его данная болезнь никак не беспокоит. Заболевание может перейти в хроническую форму.

Следует отметить, что в тех случаях, когда ПЦР анализ крови показал положительный результат, назначение лечебных мероприятий просто необходимо.

Анализ ПЦР имеет еще и количественную характеристику. Количественный результат оценивает только специалист, он индивидуален для разных инфекций.

Основываясь на количественной характеристике, врач способен понять, насколько активен данный патологический процесс, поставить точную стадию развития конкретного заболевания.

Благодаря анализированию полученных результатов специалист может выбрать необходимый препарат и, возможно, пересмотреть дозировку препарата.

Точность ПЦР диагностики

Специалистам дают ПЦР 3 важнейших характеристики, среди которых выделяют:

1. Точность.
2. Специфичность.
3. Чувствительность.

Диагностика инфекций методом ПЦР имеет большую вероятность обнаружения инфекционных агентов. ПЦР анализ крови и других жидкостей высокоспецифичен. С его помощью можно легко выявить конкретный инфекционный процесс. Диагностика ПЦР обладает высокой чувствительностью. Если в исследуемом материале содержится минимальное количество инфекционных агентов, метод ПЦР будет всегда положителен.

Наиболее редко бывает ложноположительный результат. Если инфекции нет, то и результат отрицателен.

Пцр на скрытый инфекционный процесс

Если у человека подозревают ИППП, то назначают анализ крови на скрытые инфекции. Половые заболевания можно выявить лишь путем обследования больного. Скрыто могут протекать такие заболевания, как:

• хламидиоз;
• уреаплазмоз;
• гонорея;
• герпес;
• гарднереллез;
• микоплазма.

Вышеперечисленные половые инфекции достаточно распространены и при этом коварны. На начальной стадии развития заболевания они не дают яркой симптоматики, и больные не обращаются за помощью. ПЦР анализ крови, соскобы со слизистой мочеиспускательного и цервикального канала обязательны при подозрении на эти инфекции.

ИППП очень негативно влияют на репродуктивную систему. Они способны вызвать бесплодие или пороки у плода. В связи с этим перед тем, как планировать беременность, нужно сдать анализ ПЦР.

Популярностью пользуется ПЦР на 12 инфекций. Диагностика методом ПЦР 12 проводится благодаря сдаче мазков из половых органов. Забор материала производится через 2 часа после акта мочеиспускания. За 2 дня до исследования нельзя вводить во влагалище суппозитории и проводить спринцевания. Результат анализа будет готов уже через 2 дня.

Стоимость ПЦР колеблется в зависимости от исследуемой инфекции. Цена находится в диапазоне от 200 до 500 рублей за каждую инфекцию. Войти и обследоваться в частной лаборатории можно и самостоятельно, без направления врача.

Анализы методом ПЦР

Полимеразную цепную реакцию (Polymerase chain reaction, ПЦР, PCR) изобрёл в 1983 году американский биохимик Кэри Б. Мюллис. В 1993 году за это открытие он был удостоен Нобелевской премии.

Сегодня области применения ПЦР как современного метода молекулярной биологии чрезвычайно широки. Особое место диагностика ПЦР занимает в медицинской практике. И причина этому достаточно проста: полимеразная цепная реакция делает невозможное возможным.

Часто диагностику ПЦР образно описывают как метод, с помощью которого можно находить иглу в стоге сена и затем строить стог из этих игл. «Иглой» является крошечный фрагмент генетического материала клеток (ДНК или РНК).

Таким образом, открытие этого метода — одно из наиболее выдающихся событий в области молекулярной биологии за последние десятилетия. Развитие метода ПЦР позволило медицинской диагностике в целом подняться на качественно новый уровень.

Основы ПЦР

Основа метода — многократное избирательное копирование (амплификация) определённого участка ДНК с целью получения такого количества генетического материала, которого будет достаточно для визуальной детекции. При этом многократно копируется (амплифицируется) только заданный участок ДНК при условии, что он присутствует в исследуемом биоматериале.

Кроме того, исследование помимо простого увеличения количества копий участков ДНК позволяет проводить другие манипуляции с генетическим материалом. Поэтому метод широко применяется в научных исследованиях, биологической и медицинской практике: в диагностике инфекционных и наследственных заболеваний, при выявлении мутаций, генотипировании, установлении отцовства, идентификация личности и др.

Пцр в диагностике инфекционных болезней

Сегодня ПЦР-диагностика инфекций — один из самых точных, чувствительных и эффективных клинических лабораторных методов. Причём спектр выявляемых возбудителей практически неограничен – была бы разработана тест-система для ПЦР-анализа искомого возбудителя.

Благодаря своей высокой чувствительности, ПЦР позволяет выявить возбудителя даже при его минимальном содержании (то есть в исследуемом биоматериале присутствуют всего несколько молекул его ДНК).

ПЦР выявляет возбудителей инфекционных заболеваний тогда, когда это невозможно сделать другими методами (иммунологическими, культуральными, микроскопическими).

Поэтому для целого ряда возбудителей инфекций метод полимеразной цепной реакции стал «золотым стандартом», он проверен временем и апробирован клинически. В современной лабораторной диагностике инфекционных болезней ПЦР — самый чувствительный и специфичный метод прямого обнаружения возбудителей.

Это позволяет не только установить этиологию заболевания, но и контролировать течение инфекционного процесса и оценивать эффективность проводимого лечения.

Анализ на ИППП методом ПЦР особенно актуальны при бессимптомном течении инфекционного процесса, вызванного безусловно-патогенными микроорганизмами (Хламидия , качественное определение ДНК; Микоплазма, качественное определение ДНК; Возбудитель гонореи, качественное определение ДНК;  Возбудитель трихомоноза, качественное определение ДНК). Например, при хронической гонорее у женщин даже с помощью бактериологического метода часто не удается выявить гонококк, несмотря на имеющиеся симптомы хронического воспалительного процесса в шейке матки или уретре.

Современная ПЦР-диагностика позволяет не только выявить генетический материал возбудителей инфекций, но и определить концентрации их ДНК/РНК (количественный формат исследования).

Определение количества возбудителей имеет важное значение в решении вопроса о назначении лечения, особенно если выявлены условно-патогенные микроорганизмы (Микоплазма, количественное определение ДНК; Типирование уреаплазмы, количественное определение ДНК) .

Одним из основных направлений развития метода ПЦР является разработанный в CMD формат «Мультипрайм», позволяющий выявить в одной пробирке (и одной реакции) нескольких патогенов.

ПЦР-диагностика гепатитов

В настоящее время известно как минимум 5 вирусов, способность которых вызывать поражение печени доказана. Это возбудители гепатита А, В, С, D, Е. В редких случаях гепатит может быть вызван вирусами Эпштейна-Барр и простого герпеса.

Способность поражать печень таких агентов как вирусы ТТ и гепатита G сегодня признается не всеми.

Все эти вирусы относятся к различным семействам, имеют разные биологические свойства и соответственно, тактика лечения будет тоже значительно отличаться в зависимости от этиологии гепатита.

Учитывая вышеизложенное, весьма актуальной проблемой является адекватная этиологическая диагностика вирусных гепатитов с выявлением конкретного возбудителя.

Без использования современных молекулярно-биологических методов это невозможно.

Поэтому диагностика гепатитов методом полимеразной цепной реакции — один из самых важнейших шагов в установлении причины заболевания и определения дальнейшей тактики лечения.

Пцр в диагностике вич-инфекции

В настоящее время для лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции используется наиболее доступный и одновременно чувствительный подход — обнаружение в крови антител к ВИЧ с помощью иммуноферментного анализа (ИФА) – с последующим подтверждением положительных результатов анализа методом иммуноблоттинга (ИБ). Эффективность выявления лиц, инфицированных ВИЧ, с помощью данного подхода может достигать 99% и более.

Но серологическая диагностика ВИЧ-инфекции имеет ряд ограничений:

1. Неэффективность в период т.н. «серологического окна» (в первые недели после заражения антитела не выявляются по причине их отсутствия или низкой концентрации).
2. Антитела к ВИЧ длительное время выявляются у всех детей, рожденных от ВИЧ-инфицированных матерей.
3. Ложноположительные результаты ИФА из-за присутствия в крови антител к антигенам, сходным с антигенами ВИЧ.
4. Ложноотрицательные и сомнительные результаты ИФА и иммуноблоттинга (особенно у пациентов в терминальной стадии заболевания).

Поэтому анализы ПЦР при обследовании на ВИЧ-инфекцию сегодня находят всё более широкое применение. Согласно «Методическим рекомендациям о проведении обследования на ВИЧ-инфекцию» (утв. Минздравсоцразвития РФ 06.08.

2007) «при наличии эпидемиологических критериев, свидетельствующих о недавнем риске заражения ВИЧ для пациентов и при этом предположительно ложноположительных или ложноотрицательных результатов в ИФА и ИБ, например, при обследовании детей, рожденных от ВИЧ-инфицированных матерей, или пациентов в периоде «серонегативного окна» используется метод ПЦР, при котором обнаруживается генный материал ВИЧ…..». А в случае уже установленного диагноза ВИЧ-инфекции анализ методом ПЦР используется для прогноза, динамического наблюдения и мониторинга проводимой терапии.

В Центре молекулярной диагностики (CMD) можно сдать ПЦР-анализ на ВИЧ анонимно.

Где сдать анализы ПЦР?

Для этого обращайтесь к разделу сайта «Где сдать анализы».