Вич и как узнать достоверность результата

Анализ на ВИЧ методом ИФА: точность, достоверность

Инфекция, вызванная вирусом иммунодефицита человека, – серьезный диагноз. Ошибки при диагностике могут привести к плачевным последствиям. Анализ ИФА на ВИЧ – наиболее доступный метод исследования, но не во всех случаях он информативен.

Что такое ИФА

ИФА – иммуноферментный анализ. Задача метода ИФА – выявление антител к вирусу иммунодефицита в биологическом материале.

С помощью метода можно отследить присутствие в жидкости не самих вирусов, но только антител, вырабатывающихся в ответ на их присутствие. Иммуноферментный анализ широко используется при диагностике ЗППП.

Он помогает выявить ВИЧ и другие инфекции, передающиеся половым путем.

Существует несколько видов ИФА: прямой вариант, косвенный вариант, метод «сэндвича». В любом случае методика основана на определении наличия антител, которые служат индикатором проникновения чужеродного агента. Чтобы выявить эти «метки», биологический компонент обрабатывают ферментами.

Иммуноферментный анализ определяет антитела с точностью 96 – 98%, погрешность незначительна. Она составляет 2 – 4%.

Ифа – метод диагностики вич

ИФА анализ на ВИЧ – это первый этап диагностики. Антигенами вируса иммунодефицита являются протеины p24, p15, p17, p31 и гликопротеины gp 41, gp55, gp66, gp120, gp160.

Чтобы обнаружить вирусный белок, берут порцию крови из вены. Образец, направленный на исследование крови ИФА, обрабатывают иммуноферментными реагентами. Из крови выделяют сыворотку. Если в ходе исследования обнаруживаются антитела к ВИЧ, значит, в крови уже присутствует вирус.

Кровь сдают строго натощак. За 2 дня до анализа не рекомендуется есть жирную пищу и употреблять алкоголь. Следует за 14 дней прекратить прием противовирусных препаратов.

Преимущества метода:

• сравнительно небольшая стоимость;
• высокая стабильность реагентов;
• высокая чувствительность;
• короткий срок проведения;
• минимальное влияние человеческого фактора.

Современные тест-системы для ИФА производят по мировым стандартам. Это повышает точность метода.

Иммуноферментный анализ не всегда дает достоверные результаты. После попадания вируса в кровь начинается латентная (скрытая) стадия развития. Период, пока вирусы не начали размножаться, и антитела еще не сформированы, называется «время серонегативного окна».

Делать ИФА на этом этапе бессмысленно. Если заражение произошло, результат будет ложноотрицательным. Как быстро вирус себя обнаружит, зависит от того, какое количество опасных клеток попало в организм.

При незащищенном половом акте или переливании зараженной крови этот срок будет минимальным.

Для высокой достоверности ИФА на ВИЧ исследование проводят трижды. Сроки сдачи ИФА на вирус иммунодефицита человека:

• через 6 недель после вероятного контакта,
• через 3 месяца,
• спустя полгода.

ИФА 4 поколения на ВИЧ – метод, наиболее информативный на ранних сроках заражения. Его можно проводить уже через 1 месяц после предполагаемого инфицирования.

Тест на ВИЧ 4 поколения является дорогостоящим по сравнению с аналогом 3-го поколения. Поэтому в государственных медучреждениях он используется как дополнительный метод диагностики. Бесплатно проводится тест 3.

Если по его итогам однозначного ответа дать нельзя, пациента направляют на ИФА 4 поколения.

Важно! Сразу после инфицирования человек становится заразным. Он опасен для окружающих, даже когда еще не знает о своем диагнозе!

Если при ИФА выявлены антитела к антигенам ВИЧ, необходимо проводить дополнительные исследования. К таким относится полимеразная цепная реакция (ПЦР). Достоверность этого метода – 80%. С помощью ПЦР исследуют кровь, сперму и влагалищные выделения.

Биологическую жидкость расщепляют в медицинском реакторе, затем подвергают обработке ферментами. В итоге получают данные о том, какова концентрация клеток ВИЧ в жидкой среде.

Из-за большой погрешности (20%) при положительном результате дополнительно проводят иммунный блоттинг.

Следующий этап диагностики – тест Комбо (или иммунный блоттинг). Это высокочувствительное исследование (98% достоверности), которое проводят, если через 6 месяцев результаты ИФА неоднозначны.

Расшифровка результатов ИФА

Время расшифровки составляет от 24 до 48 часов. Если необходимо получить информацию срочно (требуется хирургическое вмешательство), расшифровку проводят за 2 часа. В провинциальных медицинских пунктах не всегда есть необходимые реагенты. Пробу берут по месту обращения, затем ее передают в областной центр. При таких обстоятельствах итог можно узнать через 1- 2 недели.

Результат иммуноферментного анализа может быть либо положительным, либо отрицательным; других вариантов нет.

Даже если при первичном и повторных ИФА итог был положительным, пациента нельзя признать ВИЧ-инфицированным. Возможна погрешность. Причины ложноположительного результата:

• хронические заболевания;
• длительные инфекционные заболевания;
• беременность.

Поэтому результат анализа должен быть уточнен дополнительными исследованиями.

Если при проведении иммуноблоттинга на ВИЧ результат положительный (реактивный), человек считается ВИЧ-инфицированным, а отрицательный тест значит, что он здоров.

Проводится еще тест на вирусную нагрузку. Этот показатель при ВИЧ характеризуется количеством вирусных частиц в единице крови (анализ определяет РНК-частицы вируса). Нормой считается количество от 5000 до 15000 клеток вируса в единице крови.

Если цифра находится в этих пределах, либо меньше, вирус неактивен. Даже в случае дальнейшего подтверждения позитивного ВИЧ-статуса человек не заметит перемен в состоянии здоровья долгое время (10 – 15 лет). Если нагрузка менее 20000 клеток, это близко к норме. Когда число вирусных клеток увеличивается, следует незамедлительно начинать противовирусную терапию.

Что делать при положительном ИФА

Отрицательный иммуноферментный анализ 3-го и 4-го поколения показывает с высокой достоверностью (98%), что человек здоров. Для подтверждения положительного ВИЧ-статуса проведения ИФА недостаточно.

Если при первом и повторных тестах в крови обнаружены антигены ВИЧ, человек получает направление на иммуноблоттинг. Когда в ходе исследований выясняется, что человек имеет ВИЧ-позитивный статус, ему следует обратиться к врачу. Он определит вирусную нагрузку и назначит терапию.

Клетки вируса со временем адаптируются к назначенным препаратам. Чтобы контролировать эффективность лечения, тест ИФА периодически повторяют.

Иногда иммуноблоттинг показывает ложноотрицательный результат. Крайне редко вирус иммунодефицита 6 месяцев (и более) не проявляет себя. Это возможно, если в кровь попало незначительное количество клеток вируса. В 0,5% от общего числа случаев диагностировать заражение удается лишь через год. В 99,5% в течение полугода после инфицирования при проведении ИФА получится достоверный результат.

Даже при проведении высокоточных исследований остается вероятность ошибки, составляющая 2%. Не следует забывать о человеческом факторе. Чтобы исключить вероятность ошибки, тест можно провести в 2-х разных учреждениях.

Достоверность анализов на ВИЧ

ВИЧ является неизлечимым заболеванием, диагностика которого возможна только после сдачи анализов крови, точность которых никогда не ставится под сомнение. А можно ли им доверять?

Насколько достоверными являются анализы на ВИЧ

ВИЧ является одним из самых страшных заболеваний современности из-за того, что лекарства от него так и не было придумано. Одновременно с этим стоит сказать, что только своевременно сданные анализы дают возможность не только успокоить, но и начать лечение на ранних стадиях.

Для того чтобы провести полное исследование на ВИЧ, требуется сдать различные анализы. Причем только врачи, могут назначить какие будут наиболее результативны в данный момент времени. Причем достоверность проведенных тестов не вызывает сомнений. Ведь только с их помощью точностью до 90-99%  выяснить произошло ли заражение ВИЧ или нет.

Проводя исследования, врачи будут учитывать возможность погрешности, а так же наличие различных факторов, способных исказить точность результатов. Причем различные анализы дают возможность получить точный результат относительно ВИЧ.

Каким будет самый достоверный анализ? В число самых точных тестов, стоит отнести иммуноферментное исследование на ВИЧ. Достоверность полученных данных не будет вызывать сомнений, так как формируется из целого ряда подтвержденных фактов.

Причем на первое место выходит периодичность проведенных исследований. А именно через какое время будет проведено первое исследование.

Следует понимать, что проведение ИФА-тестирование дает возможность быстрого обнаружения  АТ, во время диагностирования ВИЧ инфекции. Чаще всего, его проводят в первый месяц, после предполагаемого заражения. К нему прибегают когда следует провести диагностику как тех, кто предполагает наличие диагноза, так и те, кто хочет провериться.

Проведение ИФА теста проводить через 2 недели после предполагаемого заражения, будет рано, так как эффективность будет незначительной. Это связано с тем, вырабатываться антитела для защиты организма от вирусов. Они достигают своей концентрации только через месяц после  вероятного заражения.

Через какое время могут появиться первые симптомы? Кроме того, перед тем как проявятся первые симптомы, имеющие отношение к ВИЧ-инфекции,   может пройти несколько недель или месяцев.

Максимальная точность достигается только спустя месяц, когда антитела набирают нужную концентрацию. Для получения более точного результата потребуется провести анализ не ранее 3-4 месяцев, спустя вероятного заражения.

Исследование на ВИЧ с учетом количества антигенов

Проведение исследования на ВИЧ при помощи иммунного блоттинга позволит определить в каком состоянии находится иммунная система человека. Проведение исследования по поводу ВИЧ, заключается в точном выявлении антигенов – это. С его помощью можно выяснить будет человек заражен или нет.

Через какой  период будет эффективен анализ?

Когда необходимо сдавать анализ крови на ВИЧ и как это сделать

Для достижения самого достоверного результата следует обращаться для проведения анализа через месяц-два. К этому моменту антигены будет вполне различимы. А иммунная система достаточно ослаблена и требует начала лечения.

 Проведение экспресс-исследований на ВИЧ

Проведение различных видов исследований, в число которых входит ПЦР и экспресс-проверка, позволяет значительно ускорить процедуру выяснения наличия у человека в крови ВИЧ-инфекции. В итоге не нужно будет ждать месяц для получения результата. Результат можно получить через гораздо меньшее время.

При этом следует учитывать, что погрешность будет составлять около пяти процентов. Именно по этой причине анализ на ПЦР будет применяться очень редко. Чаще всего он может применяться для того чтобы выявить точное количество антител, находящихся в биологическом материале или крови больного.

Это позволяет сделать вывод относительно состояния здоровья  человека, а так же для выработки курса лечения.

При этом, ПЦР-анализ, по его достоверности нельзя считать универсальным способом проведения исследований.  Это связано с тем, что у него больше других ложноположительных результатов, требующих дополнительных обследований.

Чаще всего его используют, когда ставится диагноз заболевания, связанный с проведением скрининга для уточнения диагноза, связанного с подозрением на ВИЧ. Дает возможность определить стадию развития СПИДа.

Даже не смотря на наличие вероятности погрешности в виде ложноположительного результата, позволяет получить ответ уже на 11-15 день с момента, как произошло заражение.

И это самый быстрый способ получить ответ, который в дальнейшем может быть опровергнут или подтвержден другими способами исследований.  Особенность этого способа такова, что он берет за основу не антитела, а учитывает наличие самого вируса в организме человека.

Возможные ошибки во время обследования

 Любое исследование не может дать 100% результат. Процент погрешности будет учитываться специалистами для получения максимального результата при обследовании на ВИЧ-инфекцию. А потому могут возникать:

• ошибки технического характера, как результат неправильного хранения, транспортировки или обработки частиц крови или иных биологических образцов;
• ошибки при обследовании беременных, когда отклонение на уровне гормонов дает показатели, которые можно принять за положительный результат теста;
• возникновение ложноположительных результатов, проявляемых в результате тяжелых хронических или инфекционных заболеваний, способных дать положительный на ВИЧ результат;
• в случае нарушения работы иммунной системы, что тоже приводит к ошибкам во время диагностики и первичному результату анализов.

Именно по этой причине, получив положительный или отрицательный диагноз, рекомендуется спустя несколько месяцев провести дополнительное исследование, результат которого будет в несколько раз точнее первого или наоборот подтвердит полученные ранее данные.

Какие анализы нужно сдавать для определения ВИЧ

Анализ на ВИЧ (расшифровывается как вирус иммунодефицита человека) – это тестирование крови или других биологических жидкостей, которое позволяет определить у пациента вирус иммунодефицита.

ВИЧ и СПИД (синдром приобретённого иммунного дефицита), несмотря на высокий уровень медицины, нельзя полностью излечить, поэтому единственными способами остановить распространение этого коварного заболевания являются ранняя диагностика и профилактика.

Как проверяют на ВИЧ

Провериться на ВИЧ и СПИД можно как в поликлинике государственного лечебного учреждения, так и частных лабораторных центрах. Современная диагностика предлагает широкий спектр тестов, которые позволяют выявить заболевание на относительно ранних этапах.

Экспресс-исследование

Экспресс-тест – это анализ, предназначенный для быстрого определения ВИЧ-статуса, основой которого является ИФА.

Тест-полоска системы пропитана антигенами к возбудителю, поэтому после контакта с инфицированной кровью проявляется цветной индикатор.

Результат сверяют с показанными в инструкции примерами: две полоски красного или малинового цвета – тест положительный, одна полоска – отрицательный, нет полосок – ошибочный.

Быстрый тест позволяет за 15 минут понять, что у тебя ВИЧ без анализов в лаборатории, или узнать противоположное. Быстрые методы легко и удобно использовать дома.

Наиболее чувствительными и точными тестами на инфекцию считаются Alere HIV Combo и Alere Determine HIV-1/2, поскольку они способны выявить в организме антиген p24, который формируется в период от трех до двенадцати недель после заражения. Этот протеин представляет собой частицу ядра вируса иммунодефицита.

Иммуноферментное исследование

ИФА (расшифровывается как иммуноферментный анализ) – это самый распространённый скрининговый тест на вирус иммунодефицита, который позволяет выявить в организме антитела к возбудителю. Принцип исследования заключается в связывании меченых антигенов с иммуноглобулинами к возбудителю. Такие комплексы под ультрафиолетом светятся, поэтому их легко подсчитать.

ИФА может сообщить о наличии иммуноглобулинов к вирусу иммунодефицита уже через полтора месяца после занесения инфекции. Этот тест широко используют для массового скрининга населения, в частности анонимного. В норме эти иммуноглобулины как у женщин, так и у мужчин отсутствуют, поэтому их наличие свидетельствует об инфицировании.

Но ИФА является предварительным способом диагностики болезни, а для верификации диагноза используют иммуноблоттинг и ПЦР.

Иммуноблоттинг

Иммуноблоттингом называется изучение сыворотки крови, которое состоит из двух этапов:

• блоттинг – типирование протеинов вируса по молекулярной массе на геле с помощью электрофореза;
• иммуноферментный анализ, при котором определённые группы антигенов стрипа связываются с иммуноглобулинами ВИЧ крови, если они там, конечно, присутствуют. Связь антигена с иммуноглобулином показывает изменение цвета полосок на стрипе.

ПЦР

Полимеразная цепная реакция – это самый точный вид обследования на ВИЧ, поскольку он определяет сам вирус, а не его следы. Такая тест-система направлена на выявление генетического материала вируса иммунодефицита человека. Метод будет чувствителен уже через две недели после инфицирования.

Дороговизна ПЦР ограничивает его применение, поэтому такой тест назначают лицам с подозрением на СПИД и для мониторинга лечения пациентов.

Покажет ли общий анализ крови ВИЧ

Лабораторное общеклиническое исследование сыворотки крови не обозначается как специфический метод диагностики ВИЧ. Но в то же время он поможет определить общее состояние пациента.

В общем анализе крови при активном ВИЧ меняются такие показатели:

• уменьшается количество лейкоцитов;
• увеличивается СОЭ;
• падают уровни эритроцитов и гемоглобина.

Показания к прохождению анализов

Сегодня на ВИЧ анализы проходят добровольно, но существует ряд факторов и состояний, которые требуют обязательного обследования на эту инфекцию. К таким принадлежат следующие:

• активная половая жизнь без использования презервативов. В таком случае специалисты рекомендуют проходить диагностику 4 раза в год;
• после контакта с кровью человека, ВИЧ-статус которого неизвестен. В данной ситуации тестирование будет показательным через три месяца;
• наличие симптомов иммунодефицита;
• контакты с кровью и другими биологическими материалами в процессе работы с ними. Это касается медиков и лаборантов, которые должны обследоваться ежегодно;
• проживание в семье, где есть человек с положительным ВИЧ-статусом. Если этим человеком является супруг или супруга, то анализы на ВИЧ (заболевание СПИДом) нужно проходить четыре раза в год;
• после гемотрансфузий или трансплантации донорских органов;
• беременность. Все женщины, которые оформляются на учёт к акушер-гинекологу, обязательно тестируются на ВИЧ в первом и третьем триместрах;
• дети, рождённые от женщин с ВИЧ или СПИДом. До полутора года детям проводят ПЦР для выявления РНК вируса, а после 18 месяцев – ИФА.

Также существует группа лиц с высоким риском инфицирования ВИЧ, а именно:

• женщины и мужчины, предоставляющие интимные услуги на коммерческой основе;
• инъекционные наркоманы;
• гомосексуалисты;
• лица с беспорядочной половой жизнью;
• люди, занимающиеся анальным сексом;
• дети, рождённые от матерей с ВИЧ/СПИДом;
• пациенты, которые находятся на постоянном гемодиализе.

Лица, которые входят в перечисленные группы риска, должны проходить тестирование на ВИЧ каждые 12 недель.

Как сдавать анализ крови на ВИЧ

Услугу тестирования на ВИЧ предоставляют лаборатории учреждений, которые имеют сертификаты на проведение подобных анализов, в том числе анонимно.

На исследование лучше заранее записаться, чтобы менеджер клиники проконсультировал о том, как грамотно подготовиться к анализу.

Не рекомендуется проходить тест на ВИЧ при ОРВИ, обострениях хронических болезней или после стрессовых ситуаций, поскольку это повлияет на результат.

Готовиться к анализу ИФА или ПЦР на ВИЧ обязательно, поскольку от этого зависят точность и достоверность тестирования. При неграмотной подготовке доля ложноположительных результатов составляет от 1 до 5 %.

Особенности подготовки

Чтобы подготовиться к исследованию правильно, нужно соблюдать следующие принципы:

• анализ крови сдается строго натощак;
• за 24 часа до теста запрещается употреблять спиртные напитки;
• в течение двух дней до тестирования следует воздерживаться от половой жизни;
• утром перед забором крови нельзя курить;
• с собой в лабораторию необходимо взять документы, подтверждающие личность;
• лаборанту нужно обязательно сообщать о приёме каких-либо медицинских препаратов, если их нельзя временно отменить.

Можно ли есть перед анализом на ВИЧ

Анализ на ВИЧ проводится натощак. Это связано с тем, что после еды в пищеварительном тракте запускается процесс переваривания и всасывания питательных веществ, что приводит к качественному изменению крови.

Поэтому такая кровь становится густой, вязкой и быстро свёртывается, что затрудняет проведение исследования.

Особенно это касается жирной и солёной пищи, поэтому такие блюда исключаются из рациона за день до забора крови.

Ужин накануне должен быть легко усваиваемым и состояться не позднее восьми часов до исследования. Утром перед забором материала можно пить только чистую несладкую воду.

Процедура забора материала

Перед забором крови медицинская сестра заполняет необходимые документы, где указывает данные пациента. При анонимном тестировании указывается только код.

Забор материала для анализа занимает около пяти минут. Сдача крови проводится, в основном, до обеда.

Для исследования берут кровь из кубитальной вены, которая расположена в локтевой ямке. Для этого медицинская сестра обрабатывает кожу антисептиком, накладывает жгут на плечо и просит немного пожать кулаком, после чего вводит в сосуд иглу и набирает 5-10 мл материала в пробирку. После забора крови снимается жгут, к месту инъекции прикладывается вата, и наклеивается пластырь.

Сколько дней делается анализ на ВИЧ

Коммерческие лаборатории заключение тестирования сообщают на следующий день. В государственных больницах результат готовится дольше, время его ожидания – от 10 до 15 дней. Задержка сроков готовности анализа возможна по причине положительного теста, который требует повторного исследования центром СПИДа.

Как интерпретировать результаты

Заключение ПЦР-теста на ВИЧ будет выглядеть следующим образом:

• РНК вируса в материале не обнаружена;
• до 500 копий/мл – выявлена РНК в концентрации, которая отвечает нижнему порогу чувствительности теста;
• от 500 до 1 000 000 копий/мл – достоверность результата;
• 1 000 000 и больше копий/МЛ – концентрация РНК выше границы линейного диапазона.

При расшифровке результатов анализа ИФА на ВИЧ можно получить пять основных типов заключения, а именно:

• нереактивный отрицательный тест;
• реактивный положительный тест;
• неопределённый тест;
• ложноположительный тест;
• ложноотрицательный тест.

Что означает нереактивный отрицательный результат

Такое заключение означает, что в крови нет иммуноглобулинов к ВИЧ, и пациент абсолютно здоров. Но такой тест может быть недостоверным, если инфицирование произошло меньше месяца назад.

Реактивный положительный результат

Положительный тест на вирус иммунодефицита можно расшифровать как подтверждение наличия возбудителя в организме, так и как ложную реакцию на что-либо.

Поэтому кровь пациента с таким заключением отправляют в центр борьбы со СПИДом для повторного тестирования методом ИФА.

В ситуации, когда повторное исследование этим способом тоже покажет положительный ответ, показаны ПЦР и иммуноблоттинг.

Неопределённый результат

Таким термином может обозначаться неясный результат тестирования, поэтому пациент требует повторного ИФА.

Причинами неопределённого результата бывают техническая ошибка, перекрёстная реакция иммуноглобулинов, загрязнение тест-системы материалом от больного человека и так далее.

Такое заключение также характерно для лиц на этапе раннего инфицирования, когда количество иммуноглобулинов мизерное, и тест просто не замечает их, чтобы дать чётко положительный результат. В любой из этих ситуаций необходимо повторно сдать кровь для тестирования.

Ложноположительный и ложноотрицательный результаты

Ложноположительный результат у здорового человека может проявиться из-за проведения первого исследования с помощью высокочувствительного теста на ВИЧ.

Такой результат определяется также у лиц, переболевших шистомозом, африканской сонной болезнью, гриппом или другими инфекционными заболеваниями.

Кроме того, к ложноположительному тесту на ВИЧ могут привести беременность, системные заболевания или даже простая случайность.

Ложноотрицательный тест на ВИЧ может регистрироваться и у инфицированных пациентов. Причина может быть в том, что исследование проведено на ранних этапах, поэтому количество иммуноглобулина недостаточно для проявления положительной реакции ИФА.

Ложноотрицательный тест характерен также для пациентов, которые проходят антиретровирусную терапию, поэтому вирусная нагрузка организма минимальна.

Почему после получения отрицательного результата рекомендуют сдать кровь ещё раз

К сожалению, отрицательное заключение не всегда подтверждает отсутствие ВИЧ. Во-первых, тест может быть ложноотрицательным или проведённым слишком рано после инфицирования. Поэтому кровь на ВИЧ всегда тестируется дважды разными способами.

Достоверность диагностики

Современные тест-системы четвёртого поколения обеспечивают высокую достоверность результатов, а именно 99,5 %, поскольку они способны идентифицировать одновременно иммуноглобулины и частицы возбудителя. Тем не менее, даже после положительного ИФА 4-го поколения показаны ПЦР или иммуноблоттинг, чтобы определить количество вируса в организме.

Существует также такое понятие как срок годности анализа ИФА/ПЦР на ВИЧ, что подразумевает время, на протяжении которого тест является действующим. При тестировании на ВИЧ срок годности достаточно долгий, ведь результат действителен на протяжении 6 месяцев.

Через какое время после заражения ВИЧ покажет анализ крови

В диагностике ВИЧ существует «период диагностического окна» – это интервал от проникновения возбудителя в организм до выработки достаточного количества иммуноглобулинов, чтобы их смог заметить тест. При исследовании крови на обычных тест-системах окно составляет от 3 до 12 недель, а при использовании тестов четвёртого поколения – 3-6 недель.

Поэтому лицам, которые имели риск заразиться, например, укололись иглой с инфицированной кровью, или был незащищенный половой акт с больным человеком, необходимо пройти диагностику через месяц, а при отрицательном результате – повторить тест через 12 недель.

Где пройти обследование

Тестирование на ВИЧ проводят специализированные лаборатории, которые имеют сертификат и лицензию на проведение подобной диагностики. Референтной лабораторией для верификации результатов исследования является СПИД-центр. Исследование материала в этом учреждении абсолютно бесплатное.

Такие лаборатории функционируют как в государственных, так и частных клиниках.

Стоимость услуг

Диагностика ВИЧ: методы и исследования

Ранняя диагностика заболеваний – залог успешного лечения. Ставшее крылатым выражение, особенно актуально для ВИЧ-инфекции. Ведь заболевание неизлечимо полностью, и только своевременная диагностика позволяет взять течение болезни под контроль и выбрать тактику лечения, чтобы жить полноценной жизнью.

Ранний срок диагностики ВИЧ – со 2 недели от предположительного заражения.

Важность клинической диагностики ВИЧ

В понимании многих людей ВИЧ-инфицированный человек выглядит болезненно, изнеможенно. Он кашляет, чихает, чешется, стонет, у него все болит… На самом деле это не так! Проблема в том, что после инфицирования ВИЧ и в последующий инкубационный период симптомы полностью отсутствуют.

Затем наступает острая фаза, на протяжении которой присутствуют симптомы, напоминающие ОРВИ или грипп. Но и они вскоре проходят, и наступает, так называемый, латентный период – продолжительный промежуток времени, когда ВИЧ-инфекция себя ничем не выдает.

С момента инфицирования и до стадии пред-СПИДа может пройти порядка 10 лет, в течение которых, ни сам пациент, ни его окружение, даже и не подозревают о болезни. А когда она уже на полную мощность заявляет о себе, контролировать ее очень трудно.

Сложно противостоять осложнениям ВИЧ, поддерживать практически разрушенную иммунную систему человека.

Очень важно понимать, что, хотя и есть группы риска – гомосексуалисты, наркозависимые и девушки легкого поведения – в основной массе, пациенты с ВИЧ-инфекцией – это обычные люди.

Они учатся, ходят на работу, посещают общественные места, знакомятся в интернете – в общем, живут как все. К сожалению, но от ВИЧ никто не застрахован.

Незащищенный половой контакт в порыве страсти, заветное тату без соблюдения стерильности, маникюр за полцены у начинающего мастера, уличная драка – все эти и множество других житейских ситуаций могут обернуться инфицированием ВИЧ.

Не ошибается лишь тот, кто не живет! Мы не можем знать все наперед, не можем исправить уже совершенных ошибок, но мы можем предпринять простые шаги для исправления их последствий – обратиться в ближайший кожно-венерологический диспансер, в местную клинику или специализированный СПИД-центр для сдачи анализов и ранней диагностики ВИЧ.

Благоприятные сроки для диагностики ВИЧ

Факт возможного инфицирования и плохое самочувствие без видимых причин – два веских основания для обращения к специалистам.

Но отрицательный результат тестирования на антитела не всегда означает, что человек не инфицирован, так как существует период “серонегативного окна” (время между заражением и появлением антител), который составляет около трех месяцев. Поэтому лучше повторить их спустя 3 месяца с момента возможного инфицирования.

Если же ответ опять будет отрицательным, но ваша тревога не проходит, и вы уверены в заражении ВИЧ, тогда лабораторную диагностику необходимо повторить спустя 6 месяцев после факта заражения.

Что касается плохого самочувствия, то поводом провериться на ВИЧ может быть сочетание следующих симптомов:

• увеличение лимфатических узлов на шее, в паху, в области подмышек;
• лихорадка;
• мышечные или головные боли;
• молочница и грибковые поражения, в том числе кандидоз полости рта;
• воспаление слизистой носа, рта или глотки;
• ночная потливость;
• ломота в суставах;
• длительная диарея;
• тошнота, рвота;
• резкое снижение массы тела;
• высыпания на коже.

Важно понимать, что с момента, когда проявляются первые признаки ВИЧ-инфекции и до момента, когда заболевание переходит в латентную стадию, проходит очень мало времени – около 3-6 недель с факта инфицирования.

Нельзя упускать из вида этот промежуток времени! Поскольку последующие 8-10 лет вы будет жить, нормально себя чувствовать и даже не подозревать о том, что больны ВИЧ-инфекцией. Драгоценное время будет упущено.

Современные методы диагностики ВИЧ

В настоящее время в диагностике ВИЧ используется двухуровневый подход – косвенные и прямые тесты. Косвенные тесты позволяют обнаружить в крови пациента специфические антитела к ВИЧ, а прямые тесты помогают выявить собственно сам ВИЧ и определить степень вирусной нагрузки на организм. В России стандартная диагностика ВИЧ включает следующие методы лабораторных исследований:

• ИФА (иммуноферментный анализ).
• Иммуноблот (иммунный блоттинг).

Также могут быть применены следующие методики:

• Экспресс-тест ИХА (иммунохроматография).
• ПЦР (полимеразная цепная реакция).

Диагностические принципы лабораторных исследований и степень их достоверности приведены в нижеследующей таблице.

При проведении исследований важно использовать сверхточное оборудование и верно интерпретировать результаты анализов. В противном случае точность диагностики снижается. При этом специалисты считают, что рациональнее всего проводить исследования в следующей последовательности.

1. Сначала экспресс-диагностика, основанная на методе ИХА.
2. В случае положительного результата – еще один анализ крови по методу ИФА.
3. Положительный второй результат – проводится дообследование методом ИФА или иммуноблоттингом.
4. В исключительных случаях для окончательной постановки диагноза можно применить более сложный и дорогостоящий метод ПЦР.

Экспресс-тесты методом ИХА или скрининг ИФА,  предполагающий серологическое иммуноферментное исследование крови, выполняются в течение 15-30 минут. Высокая скорость диагностики актуальна в неотложных случаях, при планировании срочных операций.

Но для постановки окончательного диагноза необходимо использовать основной метод диагностики – иммунный блоттинг. Если результаты ИФА и иммунного блоттинга противоречат друг другу, то возможно проведение референс диагностики – анализ сразу двумя методами. К проведению ПЦР прибегают в исключительных случаях, т.к.

это наиболее дорогостоящий метод исследования. Далее разберем каждый из методов диагностики более подробно.

Экспресс-тест ИХА

Иммунохроматографические тесты неплохо зарекомендовали себя в экспресс-диагностике ВИЧ. Визуально они выглядят как полоски, на поверхность которых наносят исследуемый биологический материал (кровь, слюна).

Для получения результата потребуется всего 10-15 минут, по истечении которых на тесте проявится, или цветная и контрольная полоска – положительный результат, подтверждающий наличие антител к ВИЧ, или только контрольная полоска – отрицательный результат.

С недавнего времени американская компания OraSure Technologies наладила массовое производство экспресс-тестов для домашнего применения. Они отпускаются без рецепта, и при желании их может использовать каждый желающий. Однако необходимо учесть, что по точности диагностики ИХА уступает методу ИФА, а для постановки окончательного диагноза необходимо проведение иммуноблота.

Скрининговый тест ИФА

Принцип метода основан на способности искусственно созданных белков ВИЧ, улавливать вырабатывающиеся в организме человека специфические антитела. В результате взаимодействия, тест-система ИФА изменяет окрас индикатора. Полученные изменения цвета обрабатываются с помощью аппаратуры, которая выдает результат анализа.

При этом необходимо учесть, что скрининговый тест предназначен для выявления не ВИЧ как такового, а антител к нему. А поскольку для их появления в организме, необходимо время, то целесообразнее всего проводить скрининг спустя 3-6 недель после факта возможного инфицирования. Для этого достаточно всего 5 мл крови из вены пациента, забор которой проводят натощак, т.е.

спустя 7-8 часов после последнего приема пищи.

Помимо положительного или отрицательного результата, тест ИФА может дать ложноположительный или ложноотрицательный результат.

• Ложноположительный – речь может идти об сходных по своей структуре антителах, которые вырабатываются в организме при аутоиммунных заболеваниях, множественных миеломах, алкогольном гепатите и других патологиях.
• Ложноотрицательный – скорее всего, тестирование было проведено преждевременно или иммунная система слишком слаба и не вырабатывает антитела к ВИЧ.

При сомнительном результате тест проводится повторно.

Иммунный блоттинг

Иммуноблот – это основной метод диагностики ВИЧ, сочетающий иммуноферментный анализ (ИФА) с предварительным электрофоретическим переносом на нитроцеллюлозную полоску антигенов вируса. Для их выявления анализ проводят в три этапа:

• подготовка нитроцеллюлозной полоски;
• исследование пробы биологического материала пациента;
• трактовка результата.

Таким образом, в ходе проводимого исследования, основные белки ВИЧ распределяются по поверхности в виде отдельных полос, которые проявляются при проведении иммуноферментной реакции и подтверждают наличие или отсутствие антител к антигенам ВИЧ. Полученные в ходе исследования иммунным блоттингом результаты считаются окончательными.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

Главное отличие ПЦР от других методов диагностики – тест-система определяет ДНК вируса. С ее помощью можно выявить даже единичные вирусные частицы. Применение метода возможно уже на 5ый день после факта возможного инфицирования с точностью до 80%, что позволяет провести раннюю диагностику ВИЧ. Однако ПРЦ проводят только в исключительных случаях.

• для постановки диагноза новорожденным, появившимся на свет от ВИЧ-инфицированных матерей;
• при сомнительных результатах иммуноблота;
• для оперативного исследования донорской крови;
• для оценки уровня ВИЧ в крови инфицированного пациента.

Несмотря на высокую чувствительность метода ПЦР, он обладает меньшей диагностической чувствительностью к ВИЧ, что объясняется вариабельностью генома вируса. Поэтому для постановки окончательного диагноза данный метод не используется.

Новые и альтернативные методы диагностики ВИЧ

Недавно, сотрудниками Питтсбургского университета был разработан новый высокочувствительный тест для обнаружения скрытых вирусов – тест TZA. Для его проведения требуется меньше времени и крови пациента.

Принцип действия TZA сводится к поиску гена, который активируется только при репликации вируса.

Несмотря на то, что разработчики уверены в эффективности теста, большинство специалистов склоняется к тому, что TZA не сможет заменить существующие методы диагностики полностью, поскольку он характеризуется иным механизмом действия и не подходит абсолютно каждому ВИЧ-инфицированному пациенту.

Где и как можно пройти диагностику ВИЧ

Сегодня тест на ВИЧ-инфекцию не является проблемой. При желании пациента, кровь на анализ можно сдать анонимно и абсолютно бесплатно.

Сделать это можно в медицинских организациях по месту жительства, в Свердловском областном центре профилактике и борьбы со СПИД (г. Екатеринбург, ул. Ясная, 46.

Регистратура: (343) 383-30-18 Телефон доверия по проблеме ВИЧ/СПИД: (343) 310-00-31 (будни, с 9 до 20 часов).

Диагностика ВИЧ – дело сугубо добровольное. Однако есть четыре ситуации, для которых прохождение теста является обязательным:

1. Донорство.
2. Трудоустройство на работу, предполагающую непосредственный контакт с биоматериалом, который может содержать ВИЧ.
3. Иностранные граждане.

Лица при призыве на военную службу, поступающие в военные учебные заведения.

Но и в этих случаях тестирование не может проводиться насильно, поскольку для любого медицинского вмешательства необходимо добровольное и осознанное согласие пациента. Именно осознанное, поскольку каждый из нас должен понимать важность своевременной диагностики ВИЧ.

Что такое ИФА?

ИФА (иммуноферментный анализ) – это основной скрининговыйтест на ВИЧ. Существует множество тест-систем. Но все они основаны на единомпринципе: реакции «антиген-антитело».

Не вдаваясь в технические подробности, объясним суть методадиагностики. Иммунная система человека после заражения любой инфекцией начинаетчерез некоторое время вырабатывать антитела (иммуноглобулины). Они бываютразных видов. Наибольшее клиническое значение имеют IgM и IgG.

Первыевырабатываются сразу после заражения, но довольно быстро исчезают из крови. IgGначинают синтезироваться позже, но циркулируют в крови не временно, апостоянно, пока инфекционный агент находится в организме. Так как ВИЧ неизлечивается средствами современной медицины, иммуноглобулины в крови больногоесть всегда.

Они определяются в течение всей жизни.

Антитела являются специфическими. Это означает, что ониимеют уникальную структуру, которая зависит от возбудителя. Любой патогенныймикроорганизм является носителем антигенов. Иммунная система распознает их иначинает образование антител, которые способны взаимодействовать только с этимиангинами.

Таким образом, если человек заразился ВИЧ, антитела в его организмевырабатываются только те, которые способны связываться с антигенами вирусаиммунодефицита. Но они не способны взаимодействовать с антигенами другихвозбудителей (например, бледной трепонемы при сифилисе, с вирусом герпеса ит.д.).

Таким образом, тот факт, что в крови обнаружены антитела к ВИЧ, говорито том, что и сам вирус иммунодефицита присутствует в организме.

Для простоты восприятия представьте, что антиген – этозамок, а антитело – ключ. При попадании в организм «замка» иммунная системаначинает изготавливать под него «ключи». Но они подходят только к «замку» ВИЧ,другие «замки» им открыть невозможно.

В ходе ИФА выявляются антитела с помощью готового антигена.Он содержится в составе тест-системы. При добавлении крови пациента, если в нейсодержатся антитела, они вступят во взаимодействие с этим антигеном. Реакциястанет заметной за счет изменения окраски. Чем больше оптическая плотностьраствора, тем выше концентрация антител.

Современные тест-системы также определяют антиген ВИЧ р24.Он является более ранним маркером инфекции, чем антитела. Принцип методааналогичный. С той лишь разницей, что к готовым антителам добавляется кровьпациента, которая может содержать антиген. Если он есть в сыворотке, топроизойдет соответствующая реакция, и цвет раствора будет окрашиваться.

Тесты первых поколений определяли только антитела IgG.Современные тесты определяют также более ранние IgM, антиген р24, поэтому ониявляются более чувствительными.

Что делать при положительном ИФА?

В случае положительного ИФА диагноз ВИЧ не ставится.Проводится подтверждающий тест. Для подтверждения диагноза применяютиммуноблот. В ходе тестирования возможно получения 3 видов результатов:

• отрицательный;
• реактивный;
• слабоположительный.

У большинства пациентов будет получен положительный ответ.После этого диагноз ВИЧ считается подтвержденным.

При получении отрицательного или слабоположительногорезультата повторное исследование проводится через 1 месяц. В большинстве случаевв течение этого срока иммуноблот становится положительным, так как количествоантител в крови увеличивается.

Но если он остается сомнительным илиотрицательным, пациента наблюдают в течение 1 года, и он сдает анализы 1 раз в3 месяца.

После 12 месяцев наблюдения либо устанавливается диагноз ВИЧ, еслииммуноблот всё-таки становится положительным, либо констатируетсяложноположительная реакция ИФА, а пациент в дальнейшем не подлежит наблюдению.Его считают здоровым.

Вероятные причины ложнореактивного ИФА:

• беременность;
• гемодиализ;
• около 20% ложнореактивных тестов обусловленыдругими инфекциями.

Если ИФА и иммуноблот оказались положительными, за пациентомустанавливают наблюдение и может быть назначена антиретровирусная терапия.

Показания к лечению существенно отличаются в российских иевропейских клинических рекомендациях. В российском протоколе рекомендованопроводить антиретровирусную терапию как можно раньше, всем без исключенияпациентам. Это приводит к снижению расходов на госпитализацию и лечение больныхсо вторичными ВИЧ-ассоциированными заболеваниями и снижает распространениеинфекции.

В европейских рекомендациях лечение взрослых небеременныхпациентов начинают при:

• CD4в крови ниже 350/мкл;
• CD4 меньше 500/мкл при наличии вирусногогепатита, рака, вирусной нагрузке от 100 тысяч копий в мл, возрасте пациентапосле 50 лет, прогрессирующем снижении CD4.

В США, как и в России, практикуется раннее назначениеантиретровирусной терапии всем пациентам.

По рекомендациям ВОЗ начинать терапию следует при концентрацииCD4-клеток 500/мкл и меньше.

Раньше терапию назначали при снижении CD4 до 200/мкл. Но впоследние годы во многих странах этот порог значительно увеличился, либолечение начали назначать сразу после установления диагноза. Это связано впервую очередь с появлением новых, менее токсичных препаратов дляантиретровирусной терапии.